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Introducción: el asma alérgica está causada por la exposición a los ácaros del polvo casero (HDM). Der f 3 se cree que es uno de los principales alérgenos en los ácaros del asma alérgica. El trabajo consistió en identificar las características inmunológicas de la vacuna basada en epítopo-Der f 3 que contienen las células T y las células B.
Métodos: se generaron líneas de células T a partir de células mononucleares de sangre periférica de pacientes alérgicos a Der f 3. Tres epítopos de células T y cinco epítopos de células B de Der f 3, que hemos identificado previamente, fueron seleccionados para diseñar un polipéptido (denominados péptidos Der f 3). Construcciones de DNA que codifican estos péptidos Der f 3 se expresaron en Escherichia coli. Las líneas de células T se estimularon con los péptidos y se utilizaron en el ensayo por su capacidad proliferativa y la producción de citoquinas.
Resultados: el plásmido pET28a (+) - Der f 3-péptidos se construyó y se expresaron en E. coli BL21, y la proteína de Der f 3-péptidos se purificó y se confirmaron mediante transferencia de Western. Los Der f 3-péptidos fueron reconocidos por los clones de células T procedentes de pacientes alérgicos. Valor SI de Der f 3 grupo y f grupo 3-péptidos Der eran tanto mayor que la del grupo de PBS (P <0, 05). El Der f 3 y Der f 3 péptidos indujeron secreciones de IL-4 e IL-5 se redujeron en comparación con la del grupo PBS (P <0,05). La capacidad de unión a IgE a Der f 3-péptidos (41, 25 ± 5, 67) μg/ml se redujo drásticamente en comparación con el de Der f 3 (83,60 ± 10,92) μg/ml (P <0,05).
Conclusiones: nuestros resultados demuestran que varios de los principales epítopos de células T y de células B de Der f 3 pueden ser valiosos para el diseño de agentes inmunoterapéuticos basados en péptidos para los ácaros del asma alérgica.
Introduction: mites allergic asthma is caused by exposure to home dust mite (HDM). Der f3 is believed to be one of the major allergens in mites allergic asthma. The work was to identify the immune characteristics of Der f 3 epitope-based vaccine containing T cell and B cell epitopes.
Methods: T cell lines were generated from peripheral blood mononuclear cells of Der f 3 allergic patients. Three T cell epitopes and five B cell epitopes of Der f 3, which we identified previously, were selected to design a polypeptide (named Der f3-peptides). DNA constructions encoding these Der f 3-peptides were expressed in Escherichia coli. The T cell lines were stimulated with the peptides and tested for proliferative capacity and cytokine production.
Results: plasmid pET28a (+)-Der f 3-peptides was constructed and expressed in E. coli BL21, and the Der f3-peptides protein was purified and confirmed by Western blotting. The Der f 3-peptides were recognized by the T cell clones from allergic patients. SI value of Der f 3 group and Der f 3-peptides group were both higher than that of PBS group (P<0.05). The Der f 3 and Der f 3 peptides induced secretions of IL-4 and IL-5 were decreased compared with that of PBS group (P<0.05). The capacity of IgE-binding to Der f 3-peptides (41.25±5.67) μg/ml was decreased dramatically compared with that of Der f 3 (83.60 ± 10.92) μg/ml (P < 0.05).
Conclusions: our results demonstrate that several major T cell epitopes and B cell epitopes of Der f 3 can be valuable for designing the peptide-based immunotherapeutics for the mites allergic asthma.
