Resumen de Estudio piloto para la reconstrucción del ligamento cruzado anterior (LCA) con cultivos de fibroblastos autólogos sobre membranas de colágeno I/III

J. M. López-Alcorocho Sánchez, Pedro Guillén García , E. Rodríguez Íñigo, Isabel Guillén Vicente, R. Caballero Santos, M. Guillén Vicente, F. García Gómez, Pedro Cuevas Sánchez

• español

  Objetivo Utilizar cultivos de fibroblastos sobre membranas de colágeno I/III para tratar la rotura del ligamento cruzado anterior (LCA).

  Material y método Estudio prospectivo con 100 biopsias de LCA de pacientes con rotura de LCA con las que se realizaron cultivos primarios de fibroblastos. Tras alcanzar 20-30 millones, se transfirieron a membranas de colágeno I/III, donde se determinó su disposición mediante tinción con hematoxilina-eosina y la expresión de los genes colágeno de tipo I (Col-I), colágeno de tipo III (Col-III), tenascina-C y Sox-9 mediante PCR en tiempo real.

  Resultados A los 30 días de cultivo existía una correlación negativa entre la edad de los pacientes y la velocidad de crecimiento de los fibroblastos (p=0,003). La histología reveló que las células se disponían entre la malla formada por las fibras de las membranas, expresando Col-I, Col-III, Sox-9 y tenascina-C, características del ligamento.

  Conclusión Es posible el establecimiento de cultivos primarios de fibroblastos derivados de LCA tanto in vitro como sobre membranas de colágeno I/III sin que pierdan sus características primarias de células de ligamento

• English

  Objective: To study the possibility on the use of the in vitro cultured on I/III collagen membranes for the treatment of the broken anterior cruciate ligament (ACL).

  Patients and methodology: Prospective study performed with 100 ACL biopsies from patients with broken ACL, in which primary cultures of fibroblasts were established. When a number of 20-30 million was reached, they were transferred to I/III collagen membranes, where the architecture of the cells was examined by hematoxilin-eosin stained and the expression of the collagen type I (Col-I), collagen type III (Col-III), tenascin-C and Sox-9 genes by real time PCR.

  Results: A negative correlation between the age of the patients and the growth rate of the fibroblasts after 30 days of setting-up the culture (p=0.003) was observed. The histology revealed that the cells were disposed within the membrane fibers net, where the cells expressed the characteristic proteins of the ligament: Col-I, Col-III, Sox-9 and tenascin-C.

  Conclusion: It is possible to establish the primary culture of the ACL-derived fibroblasts, both in vitro and onto collagen I/III porcine membranes without losing their primary features of the ligament cells.