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Jhossleiny Cristina Meza Ojeda, Nelson Alfonso Vega Contreras, Seir Antonio Salazar Mercado
Objetivo. Evaluar el efecto genotóxico de un biopesticida elaborado a partir de semillas de Neem (Azadirachta indica) sobre linfocitos humanos, con el propósito de mitigar los posibles riesgos a la salud de los agricultores.
Métodos. La extracción del principio activo de Azadirachta indica se realizó mediante el método Soxhlet, y se prepararon tres concen traciones de tratamiento: C1 (0.001 mM), C2 (0.0015 mM) y C3 (0.002 mM). Se utilizó peróxido de hidrógeno como control positivo y tampón fosfato (PBS) como control nega tivo. Los linfocitos se obtuvieron de una muestra de sangre periférica autóloga, provenien te de un individuo sano de 25 años. Posteriormente, se aplicó el ensayo Cometa (SCGE) en condiciones alcalinas, utilizando la técnica de sándwich para la protección y fijación celular. Las muestras fueron teñidas con GelRed y observadas con un microscopio Optika Italy B-510, con objetivo de 40x. Las imágenes fueron capturadas y analizadas mediante el software Comet Score™. Se empleó como parámetro de medición el porcentaje de ADN en la cola del cometa (%ADN en cola).
Resultados. Los tratamientos C2 y C3 presentaron un mayor porcentaje de ADN en cola en comparación con C1 y el control negativo, evidenciando un aumento en el daño genético proporcional a la concentración del extracto.
Conclusiones. La genotoxicidad inducida por el extracto de Azadirachta indica mostró una relación directamente proporcional con su concentración, lo que sugiere que, aunque se trata de un biopesticida de origen natural, su uso debe considerar cuidadosamente las dosis para evitar efectos adversos en la salud humana.
Objective. To evaluate the genotoxic effect of a Neem-based biopesticide (Azadirachta indica) on human lymphocytes, aiming to assess potential health risks for farmers and support the safe use of natural-origin compounds in pest control.
Methods. Neem seed extract was obtained using the Soxhlet extraction method and formulated into three treat ment concentrations: C1 (0.001 mM), C2 (0.0015 mM), and C3 (0.002 mM). Hydrogen peroxide was used as a positive control and phosphate-buffered saline (PBS) as a negative control. Human lymphocytes were isolated from the peripheral blood of a healthy 25-year old volunteer. Genotoxicity was assessed using the alkaline single-cell gel electrophoresis (SCGE) or Comet Test, employing the sandwich technique for cell protection and fixation. Samples were stained with GelRed, visualized under a 40x objective using an Optika Italy B-510 series microscope, and analyzed with Comet Score™ software. The percentage of DNA in the comet tail (%DNA in tail) was used as the primary damage indicator.
Results. The analysis showed a dose-dependent increase in DNA damage. Treatments C2 and C3 exhibited significantly higher DNA tail percentages, indicating greater genotoxicity com pared to C1 and the negative control.
Conclusions. The genotoxic effect of Azadirachta indica extract on human lymphocytes increases with concentration, suggesting a direct re lationship between Neem biopesticide dosage and DNA damage. While Neem is a natural alternative, careful concentration control is essential to ensure user safety.
